人转移胰腺腺癌细胞吉西他滨耐药株特性介绍
一个胰腺癌病人的腹水中的细胞移植到裸鼠后建立了这个细胞株。
注：本培养基是不直接添加吉西他滨药物的。如果客户需要直接添加的我们可以按照客户的意愿添加吉西他滨药物。
细胞特性
1） 来源：ASPC-1耐药筛选
2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长
3） 含量：>1×10^6 细胞数
4） 用途：仅供科研使用
人转移胰腺腺癌细胞吉西他滨耐药株特性运输、保存及注意事项
复苏细胞 | 冻存细胞 | |
包装 | 充液的T25细胞培养瓶 | 1mL冻存管 |
运输条件 | 常温 | 干冰 |
保存方式 | 75%酒精消毒瓶壁，置于37℃恒温细胞培养箱 | -80℃冰箱中保存过夜后转入液氮/立即复苏 |
注意事项 | 1. 收到细胞请先就培养瓶/冻存管的外观、细胞的状态，进行拍照并保存，如有问题请及时联系我们； 2. 收到的复苏细胞，若有较多细胞飘起，可能由于运输导致。请先置于37℃细胞培养箱中静置2~4h，待细胞贴壁后再做处理； 3. 复苏细胞充液培养基为不含药物的维持培养基，收到细胞后请及时更换为CM培养基； 4. 建议收到细胞后，首先进行扩增，并冻存部分细胞以备用。 | |
细胞耐药诱导过程
待细胞生长稳定后，开始倍增药物诱导剂量，每个剂量保持至细胞可以稳定生长至汇合度达50%以上。递增药物浓度依次为：0.03μg/mL、0.3μg/mL、1.5μg/mL、3μg/mL、6μg/mL、12μg/mL、18μg/mL。约10个月后，细胞可在18μg/mL GEM药物浓度下稳定生长，视为耐药细胞株构建成功，并命名为ASPC-1/GEM。
细胞培养试剂的配制
1）GEM药物的配制及保存
建议将GEM药物配制成18mg/mL的母液：即使用1mL DMSO溶液溶解18mg GEM药物，使其全部溶解。
注意：可根据用量配置药物，并将药物分装保存，避免反复冻融导致药物失效。溶解后的GEM，4℃保存1周，-20℃保存1个月，-80℃保存6个月。
2）冻存液的配制
90%优质胎牛血清+10%DMSO，现用现配。
3）CM培养基的配制（推荐使用iCell-h005-001b）
成分 | 体积/浓度 |
优质胎牛血清 | 10% |
双抗 | 1% |
GlutaMAX-1 | 1% |
GEM | 0~18μg/mL |
DMEM培养基 | 补充至所需体积 |
细胞培养条件
气相：空气，95%；二氧化碳，5%；温度：37℃，培养箱湿度为70%~80%。
