细胞名称:H1
细胞描述:人胚胎干细胞,曾用名WA01
形 态:球形克隆,贴壁生长
来源性别:男性
组织:内细胞团
冻存日期/代数:详见 冻存管/培养瓶 标识
建议复苏培养体系:1 个 T25 培养瓶或6cm培养皿
细胞状态:良好
支原体检测结果:阴性
细胞用途:仅供科研使用。
STR鉴定结果:
D5S818 9 11
D13S317 8 11
D7S820 8 12
D16S539 9 13
VWA 15 17
TH01 9.3 13
AMEL X Y
TPOX 8 8
CSF1PO 12 13
2.培养流程
2.1.复苏
在开始复苏前,将所有试管、预热后的培养基和培养皿准备好,已确保尽快完成复苏过程。
1.将冻存管从液氮中取出,快速在37℃水浴槽中解冻,轻柔持续地摇动冻存管,直到只剩下一个小冷冻团。从水浴槽取出冻存管,70%乙醇擦拭进行消毒。
2.使用移液管将冻存管中含有H9细胞的冻存液轻轻转移至一个含有5-6mL已经预热的培养基的15mL离心管中,过程必须轻柔防止吹散细胞团。
3.室温300g离心5min。
4.吸出培养基,确保细胞团完整。
5.然后缓慢加入1mL培养基,用手指轻弹离心管底部,使细胞团脱离底部并分散。
6.轻轻的将此1mL细胞悬液转移至已包被的培养皿/板/瓶,根据最终培养细胞的液体体积,加入ROCK inhibitor Y27632,终浓度为10μM。
7.将培养皿/板/瓶置于37℃培养箱中,每天更换培养基(换液不需要再添加Y27632,但培养基需提前预热)。
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