人胚胎干细胞

细胞名称：H1

细胞描述：人胚胎干细胞，曾用名WA01

形 态：球形克隆，贴壁生长

来源性别：男性

组织：内细胞团

冻存日期/代数：详见 冻存管/培养瓶 标识

建议复苏培养体系：1 个 T25 培养瓶或6cm培养皿

细胞状态：良好

支原体检测结果：阴性

细胞用途：仅供科研使用。

STR鉴定结果：

D5S818 9 11

D13S317 8 11

D7S820 8 12

D16S539 9 13

VWA 15 17

TH01 9.3 13

AMEL X Y

TPOX 8 8

CSF1PO 12 13

2.培养流程

2.1.复苏

在开始复苏前，将所有试管、预热后的培养基和培养皿准备好，已确保尽快完成复苏过程。

1.将冻存管从液氮中取出，快速在37℃水浴槽中解冻，轻柔持续地摇动冻存管，直到只剩下一个小冷冻团。从水浴槽取出冻存管，70%乙醇擦拭进行消毒。

2.使用移液管将冻存管中含有H9细胞的冻存液轻轻转移至一个含有5-6mL已经预热的培养基的15mL离心管中，过程必须轻柔防止吹散细胞团。

3.室温300g离心5min。

4.吸出培养基，确保细胞团完整。

5.然后缓慢加入1mL培养基，用手指轻弹离心管底部，使细胞团脱离底部并分散。

6.轻轻的将此1mL细胞悬液转移至已包被的培养皿/板/瓶，根据最终培养细胞的液体体积，加入ROCK inhibitor Y27632，终浓度为10μM。

7.将培养皿/板/瓶置于37℃培养箱中，每天更换培养基（换液不需要再添加Y27632，但培养基需提前预热）。