人诱导多能干细胞（尿液来源）

细胞介绍

的人诱导多能干细胞（iPSC-U1）是由人尿液来源人肾上皮细胞通过非整 合的方法诱导获得。人 iPSC 在无饲养层、化学成分明确、并且无动物源成分的 人多潜能干 细胞培养体系中培养，适合临床级的干细胞研究和应用。人 iPSC 在人多潜能干细胞培养 体系中可以长期稳定快速增殖，具有高度近似人 ES 细胞的克隆形态和基因表达， 长期维 持正常核型，并在体内外具有三胚层分化潜能。

一、 铺板 1. 提前一天在4℃冰箱中解冻干细胞铺底工作液添加剂。

2. 用预冷的移液管将铺底工作液添加剂和铺底工作液基础液按照 1:9的比例混匀。

3. 将铺底工作液覆盖瓶底（6孔板1mL，依次类推），置于37℃培 养箱过夜。

4. 使用前，用PBS洗涤一次。 注意：可根据试剂用量将铺底工作液添加剂分装保存-80℃，避 免反复冻融。

二、 细胞复苏:

1. 首先开启复苏添加剂小瓶上的铝盖，并用酒精棉擦拭其表面， 使用注射器吸取5mL复苏基础培养基加入到瓶中，颠倒混匀。

2. 将复苏添加剂和复苏基础液按照0.5mL：10mL的比例混匀，配 置后的复苏CM培养基保存4℃（可保存2周，可根据试剂用量将 添加剂分装保存于-80℃，避免反复冻融）。

3. 37℃水浴中，迅速解冻细胞，用酒精棉擦拭，转移至无菌操作 台中。

4. 将细胞悬浮液转移至含有5mL复苏CM培养基的15mL离心管中 200g离心5min。

5.弃上清，加入适量复苏CM培养基，轻柔重悬细胞，接种到包被 好的培养瓶中。

6. 水平十字摇匀，室温放置15min.显微镜下观察大部分细胞贴壁后 ，放入5%CO 的37℃培养箱中。

7. 培养24h后，弃掉复苏CM培养基，加入新鲜的干细胞CM培养基